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小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒說(shuō)明
【信息說(shuō)明】
中文名：小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒
別名：小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA Kit
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個(gè)月
范圍：科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
檢測(cè)種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
常見ELISA試劑盒：白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、趨化因子、細(xì)胞因子受體、粘附分子、生長(zhǎng)因子、凋亡因子等等。
樣本類型：適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞上清、組織勻漿等樣本。
【主要組成】
1、30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ；
2、酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶；
3、酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ；
4、樣品稀釋液 6ml×1 瓶 ；
5、顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ；
6、顯色劑B 液 6ml×1/瓶 ；
7、終止液 6ml×1 瓶；
8、標(biāo)準(zhǔn)品（48ng/ml） 0.5ml×1 瓶；
9、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶；
10、說(shuō)明書 1 份；
11、封板膜 2 張；
12、密封袋 1 個(gè)；
【操作步驟】
1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8、取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
【注意事項(xiàng)】
1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。
2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7、避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
8、嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作方法進(jìn)行操作。說(shuō)明書以英文說(shuō)明書為主。
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