質(zhì)粒中量提取試劑盒，Plasmid Midi Kit(2)詳細(xì)介紹

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名稱：質(zhì)粒中量提取試劑盒

品牌：Omega

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

用途：從15-50ml細(xì)菌培養(yǎng)液中純化200-250ug高純度的質(zhì)粒DNA

英文名/型號(hào)：Plasmid Midi Kit(2)

英文名/型號(hào)：Plasmid Midi Kit(10)

英文名/型號(hào)：Plasmid Midi Kit(25)

英文名/型號(hào)：Plasmid Midi Kit(100)

質(zhì)粒中量提取試劑盒特點(diǎn)：  

1.不需要使用有毒的苯酚，lvfang等試劑，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、從50-70 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中，可快速提取150μg -600μg純凈的高拷貝質(zhì)粒DNA，提取率達(dá)80-90 %。

2.獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高，濃度高，超螺旋比例高，純度好，可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。 3. 內(nèi)毒素含量極低（< 0.1 EU/μg DNA），可直接應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

Plasmid Midi Kit(2)操作注意事項(xiàng)：

1.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb 的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，同時(shí)按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。

2.提取大質(zhì)粒時(shí)操作動(dòng)作要輕柔，應(yīng)該使用剪大了開口的吸頭，防止機(jī)械剪切對(duì)DNA的損壞。

3.DNA沉淀液沉淀離心后，可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀，擔(dān)心DNA丟失，可保留上清液，待完成全部操作后電泳鑒定，以確定是否獲得終產(chǎn)物（數(shù)百微克DNA離心沉淀在管的側(cè)壁上，可能無法看到明顯團(tuán)塊）。

4.得到的質(zhì)粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動(dòng)位置不一造成，與提取物培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短、提取時(shí)操作劇烈程度等有關(guān)。

5.質(zhì)粒DNA確切分子大小， 必須酶切線性化后，對(duì)比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質(zhì)粒，泳動(dòng)位置不確定，無法通過電泳知道確切大小。

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