血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法
			  點(diǎn)擊次數(shù):1600 更新時(shí)間:2016-06-27
			    分析:血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法
  
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
  
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量。
  
實(shí)驗(yàn)方法
  
材料:
  
1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
  
2.1%H2O2
  
3.10%醋酸溶液
  
4.分光光度計(jì)
  
方法:
  
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
  
2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度。
              
  
3.計(jì)算公式
  
血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
  
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
  
參考范圍:0-40mg/L
  
注意事項(xiàng)
  
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
  
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
  
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確
          ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量。
實(shí)驗(yàn)方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計(jì)
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度。
| 試劑 (ml) | 測(cè)定管 | 空白管 | 
| 2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液 | 0.5 | 0.5 | 
| 患者血漿 | 0.02 | / | 
| 1% H2O2 | 0.5 | 0.5 | 
| 混勻后室溫放置10min | ||
| 10%醋酸溶液 | 5.0 | 5.0 | 
| 室溫放置10min | ||
3.計(jì)算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
參考范圍:0-40mg/L
注意事項(xiàng)
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確






 
 
